请问在割胶回收实验中,如何提高DNA的回收率?

Agarose抑制DNA与吸附材料的结合,将不含DNA片段的Agarose切除,能显著提高回收效率。DNA结合到吸附材料,需要一定浓度的结合剂,Agarose多了,结合剂(Solution Sn) 的相对浓度就会下降,回收率就受到影响。大多数情况下,由于电泳时琼脂糖的浓度不同,切下的胶块有大有小,得率自然不同。回收的得率还与回收片段的大小有关,提高结合剂的相对浓度,增加DNA与吸附材料作用时间,控制好离心速度都可以在一定程度上提高得率。改善洗脱条件,如提高洗脱溶液的pH值、温度、增加洗脱液的体积等也可以提高得率,但如果pH过高,可能会影响下游反应,通常情况下来用pH8-8.5为宜。