服务简介
TALEN基因编辑工具介绍
TALE 构建技术（Transcription activator–like effector engineering technology）是基于植物病原体黄单胞菌( Xanthomonas) 分泌的一种转录激活子样效应因子( transcription activator–like effector，TALE) 可以识别DNA序列的原理而设计和构建靶向特异基因的TALE蛋白的技术。TALE 蛋白是由N 端分泌信号、中央DNA结合域、核定位信号和C端激活域构成。TALE蛋白的DNA结合域是由可以识别单个核苷酸碱基的氨基酸序列模块串联而成的， 氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有恒定的对应关系。利用TALE的序列模块，可组装成特异结合任意DNA序列的模块化组合蛋白，从而达到识别内源性基因的目的。
而TALEN 技术是将TALE 蛋白中的DNA结合域与FokI 核酸内切酶的切割域融合，设计和构建能在特定基因位点产生双链断裂的的技术。双链断裂可以极大的提高断裂位点周围的基因修复活性，利用易错修复(非同源末端联结)或者同源重组修复的方式实现特异位点DNA的改造，例如定点基因敲除 (Knock-out) 、基因敲入 (Knock-in) 或点突变修饰等等。研究结果显示，人工构建的TALENs能够对动植物细胞的基因组进行高度特异的和高效的修饰。TALENs的活性和DNA序列识别的特异性在酵母、植物和哺乳动物包括人类等多种细胞中已经相继得到验证。
TALEN剪切DNA双链的机制举例
TALEN技术特点
TALEN是基因编辑的第二代技术，该技术的脱靶率是最低的，因此其应用无法被CRISPR/Cas9完全替代。CRISPR/Cas9系统可参看：CRISPR/Cas9服务
首先，TALEN技术是可以跨越物种限制的，可以广发运用于模式动物的基因编辑，畜牧业及农作物的遗传育种等等方面，经过基因编辑后的性状是可以稳定遗传继承的。
其次，相比第一代基因编辑工具ZNF，利用TALE模块识别DNA序列更加灵活，更容易设计出有效靶点。
最重要的一点，TALEN是利用TALE模块去识别特定碱基，需要高度特异的匹配，拖把率是第三代CRISPR/Cas9系统无法超越的。本公司基因编辑平台拥有完善的TALEN技术与CRISPR/Cas9技术，两大平台优势互补，为您的研究轻松加速。
赢润生物TALEN载体构建服务优势
- 本公司提供的质粒均来源于最新的顶尖杂志中已使用过的系统，其有效性已被反复被验证。
- 靶点的筛选: 不同靶点的有效性存在差异，本公司免费为您设计三个特异性靶点。
- 载体系统的构建：TALE的核酸识别单元为间隔34个恒定氨基酸序列的双联氨基酸。双联氨基酸与A、T、C、G有恒定的对应关系，即NI→A，NG→T，HD→C，NN→G。因此，欲使TALE特异识别某一核酸序列（靶点），只需按照靶点序列将相应TALE单元串联即可。本公司会挑选三个靶点开展细胞水平实验对TALEN质粒活性进行检测，最终挑选出一对高活性的TALEN质粒交付客户。
服务价格及周期
| 服务内容 | 服务价格 | 服务周期 |
|---|---|---|
| CRISPR/Cas9TALEN质粒构建 | 2000 | 2-3周 |
| TALEN mRNA | 1000 | 1-2周 |
| TALEN质粒活性检测 | 3000 | 2-3周 |
客户须知
客户需提供外显子序列或者基因序列号
服务承诺
- 以上服务均为针对一个靶点设计的TALEN质粒，并不保证所选靶点的切割效率，建议同时购买三个靶点以筛选出最优靶点；
- 提供第三方测序报告，序列准确无误；
- TALEN质粒活性检测提供荧光显微镜检测细胞荧光表达情况的报告，确认靶点有效性。
参考文献
1.Richter, A. et al. Designer TALEs team up for highly efficient gene induction. Nature Methods. 2013 Vol. 10. No. 3: 207-208
2.Perez-Pinera, P. et al. Synergistic and tunable human gene activation by combinations of synthetic transcription factors. Nature Methods. 2013 Vol. 10. No. 3: 239-242
3.Maeder, M.L. et al. Robust synergistic regulation of human gene expression using TALE activators. Nature Methods. 2013 Vol. 10. No. 3: 243-245