shRNA表达载体构建

服务简介：

作为RNA干扰实验的第一步，靶位点的选择以及相应的shRNA表达载体的构建，是整个RNA干扰实验的重中之重。靶位点选择恰当，shRNA干扰效率高，整个RNA干扰实验就能够事半功倍，否则，就会做许多无用功。

目前，有许多免费软件或网站能够提供靶位点选择及shRNA序列设计，但是这种免费软件算法落后，设计出的shRNA序列有效率只有25%-30%左右。与之相对应的是一些商业化软件，或者现成的商业化shRNA库，由于其算法先进、设计原则合理，其提供的shRNA序列的有效率通常能达到75%以上，即可以达到每四条shRNA中有三条有效。所以，如果采用商业化软件来设计shRNA，或者直接购买现成的商业化shRNA库，将能使您在整个RNA干扰实验之始便占得先机。

基于以上，赢润生物在国内率先引进代表RNA干扰领域全球顶尖水准的TRC (The RNAi, RNA干扰协会)开发的TRC shRNA库。该库针对人、小鼠、大鼠等数万个基因，每个基因提供3-5 条shRNA (己构建至载体上) ，总数达五万多条，且数量还在不断增加。经过大规模实验验证，其中超过75%均为有效shRNA ，其干扰效率均大于70%.

以此shRNA库为基础，针对每个基因，我们可为您提供3-5条高质量的shRNA序列，并为您构建到sRNA真核表达载体上。由于此数据库中的shRNA序列有效性超过75% ，即理论上来说，每一套shRNA克隆中，必定至少有一条shRNA的干扰效率超过70% 。所以，您再也不必担心选择的shRNA序列没有干扰效果，您再也不用费时费力费心地去一遍遍地筛选有效的shRNA序列。选用此shRNA库，您会发现，原来RNA干扰实验会如此简单!

您只需告诉我们您需要干扰的目的基因，我们就会为您从数据库中调取相应的shRNA序列信息，然后，您可以选择合适的shRNA达系统来表达shRNA ，进行RNA干扰实验。

TIPS : TRC及TRC shRNA库

TRC (The RNAi ，RNAA干扰协会)是由麻省理工学院和哈佛大学牵头建立的合作机构，包括Massachusetts General Hospital 、Harvard Med school 、Dana Farber Cancer Inst 、The Broad Institute 、Whitehead lnstitute 、MlT、Academica Sinica (Taiwan)和另外5个国际性组织，代表着RNA干扰领域的全球最顶尖水平。该组织计划在3年内构建数量达15000个人类基因和15000个小鼠基因的shRNA文库。第1版的TRC shRNA文库包括35000 shRNA克隆(其中人类基因有5300个，小鼠基因有2200个) ，其它新构建的克隆每个季度会陆续公布。

赢润生物shRNA表达系统

TRC shRNA克隆套装中的原装进口质粒，由于不带荧光标记，使得质粒转染细胞后，无法确定转染效率。针对这一不足，赢润生物将自己的shRNA表达系统与TRC shRNA库相结合，为客户提供更贴心、更灵活，且RNA干扰效率丝毫不减的shRNA表达质粒产品。也就是说， shRNA序列依然参考TRC shRNA库中的数据，而承载这些shRNA片段的载体，则采用多种启动子、多种荧光标记可供选择的赢润生物shRNA表达系统。

本公司目前提供的shRNA真核表达载体，共有hU6 、mU6 、hH1， h7SK四种pol Ⅲ型启动子可供选择，可选择携带荧光(包括绿色荧光、红色荧光)或不携带荧光。除此之外，本公司还提供mirshRNA真核表达载体，可以进行mirshRNA真核表达载体构建。

构建的shRNA真核表达载体，既可以当作普通的shRNA表达载体使用，也可以用来包装腺病毒、慢病毒或腺相关病毒。如果您的目的细胞质粒转染效率较高(建议大于70%) ，则您可以直接使用带有目的shRNA的pYr系列质粒进行RNA干扰实验。而如果您的目的细胞质粒转染效率较低，则可直接以这些载体为基础，包装腺病毒、慢病毒或腺相关病毒，然后再用病毒感染目的细胞。利用病毒的高感染效率、高表达效率，更好地进行RNA干扰研究实验。

既可以当普通的shRNA真核表达载体使用，同时又可以拿来包装腺病毒、慢病毒或腺相关病毒，花一份钱，买两样东西！而且其干扰有效性、干扰效率大部分都超过70%！这么超值、这么优秀、性价比如此高的shRNA产品，您还等什么呢？赶紧拨打我们的电话，或者通过QQ 、Email联系我们吧，您只需报上目的基因的NCBI序列号， 后面的事，我们替您完成！

赢润生物shRNA表达载体列表

选用赢润生物shRNA表达系统，具有如下优点:

1. shRNA序列数据来自国外成熟shRNA数据库，质量有保证。RNA干扰效率的高低主要取决于靶位点的选择和shRNA序列的设计，由于本公司所采用的shRNA序列来自国外成熟shRNA数据库，算法先进，靶位点成功率高，所以shRNA的干扰成功率非常高；
2. 您可以选择构建一条或者多条，灵活性高；
3. 多种启动子，有荧光或无荧光，绿色荧光或红色荧光等可自由选择，以更好地配合后续实验；
4. 载体可作为普通shRNA表达载体使用，亦可作为病毒包装系统的穿梭载体或表达载体使用，以进行腺病毒、慢病毒或腺相关病毒包装。

服务价格及周期:

客户须知:

1. 请事先确定是否需要荧光；
2. 您可以订购赢润生物shRNA克隆套装(己装载至载体的三条shRNA 、NC对照质粒) ，仅需4000元；
3. 由于小提质粒在转染细胞时，无论是浓度、纯度还是内毒素含量均不是很合格，所以本公司建议您订购一个"转染级质粒大提"服务，400元/个，至少提供转染级大提质粒100ug.如果您订购赢润生物shRNA克隆套装，且将套装中的4个质粒均做大提，则大提费用可优惠至250元/个。

服务承诺:

1. 本公司承诺，如客户订购针对某个基因的赢润生物shRNA克隆套装（3-5条shRNA）， 则本公司保证其中至少有一条shRNA是有效的，其干扰效率大于70% 。在目的细胞转染效率大于80% ，且客户检测shRNA有效性的实验方法恰当、操作正确的前提下，如果没有达到上述标准，本公司将免费为客户重新设计和构建两条shRNA 。如果五条shRNA都无效，则本公司将全额退还客户己付款项；
2. 如果shRNA序列由客户自己设计，本公司只负责成功构建shRNA表达载体，对其中shRNA的干扰有效性不做任何保证；
3. 如果客户订购的shRNA条数在三条以下，本公司不保证设计的shRNA一定有效；
4. 如果客户需委托本公司完成shRNA的有效性验证实验，则需加收验证部分的实验费用。